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茶多酚（TP）检测试剂盒（酒石酸铁比色法）
茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁比色法)
茶多酚(Tea Polyphenols，TP)是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等，是一类儿茶素为主体的黄酮化合物，儿茶素占 60~80%， 具有 C6-C3-C6 碳骨架结构，是一种重要的天然抗氧化物质，能够清除自由基。类物质茶多酚又称茶鞣或茶单宁，是形成茶叶色香味的主要成份之一，也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。研究表明茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用，能有效地阻止放射性物质侵入骨髓，并可使锶 90 和钴 60 迅速排出体外。
Leagene 茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁比色法)检测原理是以酒石酸铁为底物，利用茶多酚与酒石酸铁反应，生成稳定紫蓝色化合物，以分光光度计 540nm 处测定吸光度，在一定范围内吸光度与颜色深浅的变化成正比，与标准曲线比较进而计算茶多酚含量，该试剂盒主要用于测定植物组织、血清等样品中茶多酚含量，尤其适用于测定茶叶中茶多酚含量。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成：
| 编号 名称 | TO1203 50T | Storage |
| 试剂(A): 茶多酚标准(1mg/ml) | 2ml | 4℃ 避 光 |
| 试剂(B): TP Assay buffer | 75ml | 4℃ |
| 试剂(C): TP 显色液 | 25ml | 4℃ 避 光 |
| 使用说明书 | 1 份 | |
1、茶叶、绿茶等待测样本
2、蒸馏水
3、研钵、200 目细胞筛
4、离心管或试管
5、水浴锅或电炉
6、离心机
7、比色杯、分光光度计
操作步骤(仅供参考)：
1、准备样品：
①植物样品：取 0.2g 植物组织，研磨成粉末，加入煮沸的蒸馏水 10ml，沸水浴浸提
20min，用 200 目细胞筛过滤，滤渣再继续置于新的煮沸的 10ml 蒸馏水，相同操作提取一次，合并两次滤液，5000r/min 离心 15min，取上清液，即为茶多酚提取液。4℃ 避光保存，用于茶多酚的检测。绿茶等液体样本可直接用本试剂盒测定。
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可直接用本试剂盒测定。
③细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如有必要可用蒸馏水进行适当匀浆， 5000r/min 离心 15min，取上清液，即为茶多酚提取液，4℃避光保存。
④高浓度样品：如果样品中含有较浓度的茶多酚，可以使用蒸馏水进行适当稀释。
2、配制系列茶多酚标准：用蒸馏水和茶多酚标准(1mg/ml)，按下表进行操作，依次稀释。
3、TP 加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的 TP 浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置2 平行管，求平均值。
4、TP 测定：以空白调零，比色杯光径 1.0cm，分光光度计测定 540nm 处标准管、测定管的吸光度。
组织样本 TP 含量(μg/g)= (C×VT)/(W×VS)
式中：C=根据标准曲线求得提取液中茶多酚含量(μg/ml) VT=提取液的总体积(ml)
W=组织样本的重量(g)
VS=测定时所用提取液的体积(ml)
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可直接用本试剂盒测定。
③细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如有必要可用蒸馏水进行适当匀浆， 5000r/min 离心 15min，取上清液，即为茶多酚提取液，4℃避光保存。
④高浓度样品：如果样品中含有较浓度的茶多酚，可以使用蒸馏水进行适当稀释。
2、配制系列茶多酚标准：用蒸馏水和茶多酚标准(1mg/ml)，按下表进行操作，依次稀释。
| 加入物(μl) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 茶多酚标准(1mg/ml) | 10 | 25 | 50 | 150 | 250 | 400 |
| 蒸馏水 | 490 | 95 | 450 | 350 | 250 | 100 |
| 相当于茶多酚含量(μg/ml) | 20 | 50 | 100 | 300 | 500 | 800 |
| 加入物(ml) | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
| 蒸馏水 | 0.5 | 0.25 | 0.25 |
| 系列茶多酚标准(1~6 号) | － | 0.25 | － |
| 待测样品 | － | － | 0.25 |
| TP 显色液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
| TP Assay buffer | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
计算：
以系列茶多酚标准浓度(1~6 号)(20、50、100、300、500、800μg/ml)为横坐标， 以对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，求得回归方程。以测定管吸光度代入回归方程求得提取液中 TP 含量。组织样本 TP 含量(μg/g)= (C×VT)/(W×VS)
式中：C=根据标准曲线求得提取液中茶多酚含量(μg/ml) VT=提取液的总体积(ml)
W=组织样本的重量(g)
VS=测定时所用提取液的体积(ml)
茶多酚(Tea Polyphenols，TP)是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等，是一类儿茶素为主体的黄酮化合物，儿茶素占 60~80%， 具有 C6-C3-C6 碳骨架结构，是一种重要的天然抗氧化物质，能够清除自由基。类物质茶多酚又称茶鞣或茶单宁，是形成茶叶色香味的主要成份之一，也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。研究表明茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用，能有效地阻止放射性物质侵入骨髓，并可使锶 90 和钴 60 迅速排出体外。
Leagene 茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁比色法)检测原理是以酒石酸铁为底物，利用茶多酚与酒石酸铁反应，生成稳定紫蓝色化合物，以分光光度计 540nm 处测定吸光度，在一定范围内吸光度与颜色深浅的变化成正比，与标准曲线比较进而计算茶多酚含量，该试剂盒主要用于测定植物组织、血清等样品中茶多酚含量，尤其适用于测定茶叶中茶多酚含量。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成：
| 编号 名称 | TO1203 50T | Storage |
| 试剂(A): 茶多酚标准(1mg/ml) | 2ml | 4℃ 避 光 |
| 试剂(B): TP Assay buffer | 75ml | 4℃ |
| 试剂(C): TP 显色液 | 25ml | 4℃ 避 光 |
| 使用说明书 | 1 份 | |
1、茶叶、绿茶等待测样本
2、蒸馏水
3、研钵、200 目细胞筛
4、离心管或试管
5、水浴锅或电炉
6、离心机
7、比色杯、分光光度计
操作步骤(仅供参考)：
1、准备样品：
①植物样品：取 0.2g 植物组织，研磨成粉末，加入煮沸的蒸馏水 10ml，沸水浴浸提
20min，用 200 目细胞筛过滤，滤渣再继续置于新的煮沸的 10ml 蒸馏水，相同操作提取一次，合并两次滤液，5000r/min 离心 15min，取上清液，即为茶多酚提取液。4℃ 避光保存，用于茶多酚的检测。绿茶等液体样本可直接用本试剂盒测定。
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可直接用本试剂盒测定。
③细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如有必要可用蒸馏水进行适当匀浆， 5000r/min 离心 15min，取上清液，即为茶多酚提取液，4℃避光保存。
④高浓度样品：如果样品中含有较浓度的茶多酚，可以使用蒸馏水进行适当稀释。
2、配制系列茶多酚标准：用蒸馏水和茶多酚标准(1mg/ml)，按下表进行操作，依次稀释。
| 加入物(μl) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 茶多酚标准(1mg/ml) | 10 | 25 | 50 | 150 | 250 | 400 |
| 蒸馏水 | 490 | 95 | 450 | 350 | 250 | 100 |
| 相当于茶多酚含量(μg/ml) | 20 | 50 | 100 | 300 | 500 | 800 |
| 加入物(ml) | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
| 蒸馏水 | 0.5 | 0.25 | 0.25 |
| 系列茶多酚标准(1~6 号) | － | 0.25 | － |
| 待测样品 | － | － | 0.25 |
| TP 显色液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
| TP Assay buffer | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
计算：
以系列茶多酚标准浓度(1~6 号)(20、50、100、300、500、800μg/ml)为横坐标， 以对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，求得回归方程。以测定管吸光度代入回归方程求得提取液中 TP 含量。组织样本 TP 含量(μg/g)= (C×VT)/(W×VS)
式中：C=根据标准曲线求得提取液中茶多酚含量(μg/ml) VT=提取液的总体积(ml)
W=组织样本的重量(g)
VS=测定时所用提取液的体积(ml)
液体样本 TP 含量(μg/ml)= (C×VT)/ VS
式中：C=根据标准曲线求得提取液中茶多酚含量(μg/ml) VT=提取液的总体积(ml)
VS=测定时所用提取液的体积(ml)
注意事项：
1、提取茶多酚时，注意提前煮沸蒸馏水，以便充分提取。提取液宜 4℃避光保存。
2、提取时间过长，茶多酚会发生氧化反应，导致测定结果不准确，建议 2h 内测定完成。
3、如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定，但应注意酶标仪最大检测体积。
4、每次检测指标不宜过多，否则操作时间不一，有可能导致样本间的差异。
5、TP 显色液容易失效，建议 4℃避光保存。
6、采用分光光度计未调零情况下，Leagene 空白参考值为0.102，100μg/ml 参考值为0.265，一般情况下浓度在 200~600μg/ml 时测定结果更准确。由于仪器设备、操作方法等不同， 参考值会有差异。
7、该试剂盒测定范围为 10~1200μg/ml；以肉眼观察，浓度小于 100μg/ml 几乎呈无色， 浓度大于100μg/ml 即可显淡紫蓝色，300μg/ml 呈明显的紫蓝色。
附录：参考标准曲线范围： Leagene 测定茶多酚标准在 50、100、300、500、800、1000
μg/ml 时的吸光度，据此作出其参考标准曲线如下：
注意：由于检测仪器和操作手法等条件的不同，参考值范围会有波动，该值仅供参考，对于要求精确计算TP 含量的，可以采用标准曲线进行多点测定。
有效期：3 个月有效。4℃运输，4℃保存。
液体样本 TP 含量(μg/ml)= (C×VT)/ VS
式中：C=根据标准曲线求得提取液中茶多酚含量(μg/ml) VT=提取液的总体积(ml)
VS=测定时所用提取液的体积(ml)
注意事项：
1、提取茶多酚时，注意提前煮沸蒸馏水，以便充分提取。提取液宜 4℃避光保存。
2、提取时间过长，茶多酚会发生氧化反应，导致测定结果不准确，建议 2h 内测定完成。
3、如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定，但应注意酶标仪最大检测体积。
4、每次检测指标不宜过多，否则操作时间不一，有可能导致样本间的差异。
5、TP 显色液容易失效，建议 4℃避光保存。
6、采用分光光度计未调零情况下，Leagene 空白参考值为0.102，100μg/ml 参考值为0.265，一般情况下浓度在 200~600μg/ml 时测定结果更准确。由于仪器设备、操作方法等不同， 参考值会有差异。
7、该试剂盒测定范围为 10~1200μg/ml；以肉眼观察，浓度小于 100μg/ml 几乎呈无色， 浓度大于100μg/ml 即可显淡紫蓝色，300μg/ml 呈明显的紫蓝色。
附录：参考标准曲线范围： Leagene 测定茶多酚标准在 50、100、300、500、800、1000
μg/ml 时的吸光度，据此作出其参考标准曲线如下：
注意：由于检测仪器和操作手法等条件的不同，参考值范围会有波动，该值仅供参考，对于要求精确计算TP 含量的，可以采用标准曲线进行多点测定。
有效期：3 个月有效。4℃运输，4℃保存。
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